Отсутствие метахромазии

Кислые гликозаминогликаны нами определялись с помощью альцианового синего, толуидинового синего на буферном растворе при различных значениях рН раствора красителей (2,2-7,0) и обработкой коллоидной гидроокисью железа но Хейлу. В целях дифференцировки проводили инкубацию в растворе тестикулярной гиалуронидазы, метилирование, деметилирование, сульфатирование. Гистохимические исследования выполнялись с помощью руководства Э. Пирса (1962), а также методических рекомендаций в книге Принципы и методы гисто-цитохимического анализа в патологии (Авцын и др., 1971). Для прижизненного морфологического исследования бронхов во время бронхоскопии специальными щипцами выкусывался кусочек стенки бронха из измененных участков, а также из устьев бронхов, дренирующих пораженный участок легкого даже при отсутствии визуально патологических изменений. Иссекался кусочек ткани, включающий лишь слизистую и подслизистую оболочки, не травмируя хрящевое кольцо. После извлечения щипцов ткань снимали неострым предметом и помещали в раствор фиксатора. Мы пользовались универсальным параформальдегидпым фиксатором, приготовленным на буферном растворе по прописи Б. Уикли (1975): 4%-ный раствор параформальдегида на фосфатном буфере Миллопига (рН = 7,2-7,4). Фиксация в 4%-ном растворе формалина, приготовленного из параформальдегида, проводилась в течение 3-4 ч при температуре 4°С. Затем биоптат делился па две части: большая часть использовалась для приготовления парафиновых срезов, из меньшей нарезали 1-3 кусочка размером 1-2 мм3 (в зависимости от объема) для заливки в эпоксидные смолы. Нарезку проводили под контролем лупы, ориентируя срезы так, чтобы в них попали все взятые слои стенки.