Различные белки в одной и той же среде имеют разные электрокинетические потенциалы, поэтому скорость движения их в электрическом поле будет различна. На этом явлении основано разделение белковых фракций методом электрофореза. Принцип электрофореза на фильтровальной бумаге заключается в том, что электрофоретическая миграция происходит на полосках фильтровальной бумаги, смоченных буферным раствором и помещенных между двумя электродами; при этом фильтровальная бумага рассматривается как индифферентное тело, содержащее буферный раствор. На середину бумажной полоски наносят каплю исследуемой сыворотки (0,005-0,01 мл). Электрофорез проводят в буферном растворе, имеющем ионную силу 0,1 и рН 8,6. Используют постоянный электрический ток напряжением от 120 до 300 вольт в зависимости от продолжительности электрофореза (4-18 часов). После окончания электрофореза электрофорегаммы в течение 15 минут высушивают в сушильном шкафу, где происходит фиксация белков благодаря коагуляции, и окрашивают специальными красителями (бромфенол синий, амидошварц и др.). На окрашенной электрофореграмме отчетливо видны пятна, соответствующие расположению отдельных белковых фракций. Окрашенную электрофореграмму колориметрпруют, причем количество краски, связанной с белком, является индексом, по которому судят о количестве белка в каждой части электрофореграммы.
Читать дальше
Энзимные нарушения при токсических гепатитах
Вследствие особенностей своего анатомического положения и функционального предназначения печень подвержена повреждению различными лекарственными и химическими веществами. Поражение органа может зависеть от связывания яда и детоксикации, гиперчувствительности к данному соединению или к гемолитическим веществам, вызывающим ишемию и ограничение экскреторной функции печеночных клеток. Поражение печени зависит от силы и количества токсина или яда и пути их поступления. […]
Качества энзимных исследований
Особенно важное значение при сывороточной энзимной диагностике имеет правильный подбор энзимов, используемых для решения конкретной задачи. В начальном периоде бурного развития сывороточной энзимной диагностики существовала заметная тенденция к использованию большого числа энзимных исследований — энзимных констелляций. Это стремление, однако, не оправдалось на практике, так как большинство энзимов изменяется по одним и тем же механизмам или […]
Неотложные состояния в гериатрии
Многие острые заболевания, встречающиеся в старческом возрасте, уже описаны в предыдущих главах, поскольку они характерны не только для пожилых. Термином пожилой и старческий возраст определяют довольно большой промежуток жизни, до 30 и более лет, поэтому чем старше больной, тем больше вероятность,, что симптомы его болезни будут смазаны возрастными изменениями. Например, болевая чувствительность у стариков снижена, […]